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小动物成像系统(pe小动物活体成像)

  • 时间:2021-12-22 00:39 编辑:韩雪 来源:蚂蚁资源 阅读:163
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摘要:大家好,今天给大家介绍关于小动物成像系统(pe小动物活体成像)的相关内容,详细讲解红外热成像夜里能看清草丛的野鸡,为什么苍蝇的复眼有什么功能而做成了照相机,光声成像的5、光声成像应用等,希望可以帮助到您。
红外热成像夜里能看清草丛的野鸡,红外线热成像可以在夜间看到草的雉鸡。可以在夜间拍摄红外线热图像,因为它利用光电技术检测对象的热辐射的红外线带信号:不同温度释放的红外线不相同,并且该信号被转换为人类视觉分辨率。图像和图形进一步计算温度值。红外线热成像技术使人们能够超越视觉障碍,从而人们可以“看到”物体表面的温度分布。红外线热图像可以捕获物体本身辐射,成像根据温度差异的红外线,因此可以在全黑夜中用红外线图像拍摄。扩展信息:主要特点1与这两个乐队,人们可以让人们清楚地观察烟雾云战场前的情况。这是因为这个f蚀刻和热红外成像技术提供先进的夜视设备,并为飞机,船舶和坦克安装了全时钟系统。这些系统在海湾战争中发挥了非常重要的作用。如图2所示,物体的热辐射能量的尺寸与物体表面的温度有关。热辐射的这种特征使人们使用它没有对象的接触温度测量和热状态分析,从而为工业生产,节省能源,保护环境等提供重要的测试手段和诊断工具。参考资料来源:百度百科全书 - 红外线热成像
为什么苍蝇的复眼有什么功能而做成了照相机,苍蝇的数量可以恢复高敏化的高图形的数量。现在研究人员还模仿了飞恢复眼光系统的结构和功能。它有许多具有特定性质的小镜头,它们有2113条规则来绑定它。“复合眼镜”,用它来制作5261,制作“补体相机”4102,并且您可以在一次上占用数千个其他图像。使用此1653相机执行印章印刷血小板。
光声成像的5、光声成像应用,光子声音成像可以有效地进行生物组织结构和功能成像,提供研究形态学结构,生理特性,病理特征,生物组织代谢功能的重要手段,特别适用于癌症的早期检测和治疗监测。目前的光子成像技术主要用于科学研究。光子成像已成为一种快速发展的研究区域。今天的光子声音技术在微观实验室期间逐渐朝着宏观临床实践。目前有光子声音成像可用于:1。心血管研究:深入研究小动物生物体用于心血管疾病(血管生成/生长,心肌炎,血栓形成,心脏梗塞等),系统可以输出血红蛋白浓度和血氧血氧饱和定量数据。2.药物代谢:使用分子成像技术,监测实时在动物中的标记药物运动,从而判断药物是否可以准确到目标区域和代谢途径,以及治疗效果评估。3.肿瘤研究:直接测量和跟踪各种癌症模型中肿瘤的生长和转移,伴随血管生成,如肝癌模型,骨转移模型等,并且可用于肿瘤(或癌症治疗变化血红蛋白浓度和血氧饱和度,诸如血管生成抑制作用的信息是实时成像和分析。4.基因表达:观察和研究基因表达,细胞或组织特异性,以及它们在体内的治疗反应。5.干细胞和免疫研究:标记细胞,实时观察动物的干细胞治疗效果,并用于抗肿瘤免疫治疗。6.细菌和病毒研究:通过特异性荧光探针标记细菌和病毒,研究感染过程。转基因动物模型:大鼠等疾病模型。7.疾病的早期诊断:分子成像可以测试分子水平损伤,并遇到病理变化进入司法疾病的诊断,早期诊断疾病。和其他应用:如分子光学,脑科学研究等。

责任编辑(韩雪

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  • 全部评论(3)
  • hz
  • 安检机能检测出乌龟吗,这个问题,我很诚实地告诉你,一定会被查出来的。因为当我们进入到车站或者是机场,我们携带的包裹总是要放入到一台机器里过一遍,这个机器就是安检机,也称X光机,因为其工作原理就是通过X光扫描并成像,以分辨包裹内是否若有违禁物品。当宠物随行李进入X射线检查通道,将阻挡包裹检测传感器,检测信号被送往系统控制部分,产生X射线触发信号,触发X射线射线源发射X射线束。一束经过准直器的扇形X射线束穿过输送带上的被检物品,X射线被被检物品吸收,最后轰击安装在通道内的双能量半导体探测器。探测器把X射线转变为信号,这些很弱的信号被放大,并送到信号处理机箱做进一步处理,最后成像并显示在显示器上,宠物的轮廓就会清晰可见被发现的。还有绝对不要让宠物安检。因为安检机里有辐射。虽然不多,但会杀死宠物很多细胞。为了宠物的健康,不要让宠物安检。以上出自:网页链接
  • 2021-12-22 00:39:45
  • 黑客帝国
  • 苍蝇眼的眼睛是球形的,苍蝇的眼睛是半球形的。飞行,不能像人眼一样旋转,苍蝇看着东西,打开脖子和身体,将你的眼睛朝向物体移动。苍蝇的眼睛没有眼睛,没有眼睑没有眼睛,外层的角膜直接连接到头部的表面。它从外面看,苍蝇眼表面(角膜)是光滑且平坦的。如果它将其放入显微镜中,人们会发现苍蝇的眼睛由许多小六边形结构组成。每一个小六角形都是小眼睛,科学家称他们小眼睛。在苍蝇眼中,有超过3,000只小眼睛,在一双飞行中有超过6,000只小眼睛。这被称为由许多小眼睛组成的眼睛的雷丝。每只小眼睛的速度是一个自载系统,并且存在由角膜和晶体构成的成像系统,并且具有由光学视觉池构成的视网膜。因此,EV.小眼睛是单独的。科学家做了实验:蝇眼的角膜被剥离,放在显微镜中,你可以采用数百个相同的图像。世界上有很多动物,近1/4只动物用来阅读东西,就像普通蜻蜓,蜜蜂,萤火虫,金裤子,蚊子,飞蛾等昆虫,虾,螃蟹等跟随你的眼睛。科学家对飞行感兴趣,因为有许多惊人的功能。如果这个人的头部没有移动,眼睛可以看到的范围不会超过180度,身体后面的东西看不到它。然而,苍蝇的眼睛可以看到350度,几乎看一圈,只有一小块狭长的脑袋后面。人眼只能看到可见光,但苍蝇可以看到紫外线看不见的人。为了看到快速移动的物体,人眼不仅仅是飞。一般来说,人眼可以使用0.05秒到see对象的轮廓,而飞只有0.01秒。猎犬或自然车速表,可以随时测量你的飞行速度,所以你可以在快速飞行中追踪目标。根据这一原则,目前正在开发出一种电子仪器,可衡量飞机相对于地速,称为“飞机速度指示器”,并已在飞机上尝试。简单:安装了两个仪器的仪器,简单:安装在机身(或在头部,尾部的尾部和每个光学接收器)上安装两个灯接收器,在地面上依次接收地面上的光。信号。根据两个接收器,接收信号,测量时的飞行高度,并计算电子计算机,可以指示飞机相对于仪表上的地面的飞行速度。
  • 2021-12-22 00:39:45
  • 招财猫科技
  • 复习资料很多,下面的只是一部分  第一章 绪论  细胞生物学从显微水平、超微水平和分子水平等不同层次研究细胞结构、功能及生活史。  细胞生物学由细胞学Cytology发展而来,Cytology是指对细胞形态(特别是染色体形态)的观察。  在我国的基础学科发展规划中,细胞生物学与分子生物学,神经生物学和生态学并列为生命科学的四大基础学科。  第一章 绪论  本章内容提要:  第一节 细胞生物学研究的内容与现状  一、 细胞生物学是现代生命科学的重要基础学科  二、细胞生物学的主要研究内容  三、当前细胞生物学研究的总趋势与重点领域  第二节 细胞学与细胞生物学发展简史  附录 细胞生物学参考书:  第一节 细胞生物学研究的内容与现状  一、 细胞生物学是现代生命科学的重要基础学科  生命体是多层次、非线性、多侧面的复杂结构体系,而细胞是生命体的结构与生命活动的基本单位,有了细胞才有完整的生命活动。  细胞生物学 是研究细胞基本生命活动规律的科学,它是在不同层次(显微、亚显微与分子水平)上以研究细胞结构与功能、细胞增殖、分化、衰老与凋亡、细 胞信号传递、真核细胞基因表达与调控、细胞起源与进化等为主要内容。核心问题是将遗传与发育在细胞水平上结合起来。  二、细胞生物学的主要研究内容  1、细胞核、染色体以及基因表达的研究  2、生物膜与细胞器的研究  3、细胞骨架体系的研究  4、细胞增殖及其调控  5、细胞分化及其调控  6、细胞的衰老与凋亡  7、细胞的起源与进化  8、细胞工程  三、当前细胞生物学研究的总趋势与重点领域  1、细胞生物学研究的总趋势  细胞生物学与分子生物学(包括分子遗传学与生物化学) 相互渗透与交融是总的发展趋势;  当前细胞生物学研究中的三大基本问题:  (1)、细胞内基因组是如何在时间和空间上有序表达的?  (2)、基因表达产物----主要是结构蛋白、核酸、脂质、多糖及其复合物,他们如何逐级装备成能行使生命活动的基本结构体系及各种细胞器?  (3)、基因表达产物----主要是大量活性因子与信号分子,他们是如何调节细胞最重要的生命活动过程的?  2 、当前细胞基本生命活动研究中的重要领域:  (1)、染色体DNA与蛋白质相互作用关系-----主要是非组蛋白对基因组的作用;  (2)、细胞增值、分化、凋亡的相互关系及其调控;  (3)、细胞信号转导的研究;  (4)、细胞结构体系的装配。  3、细胞重大生命活动的相互关系  第二节 细胞学与细胞生物学发展简史  一、生物科学发展的三个阶段:  1.形态描述生物学时期,19世纪以前;  2.实验生物学时期,20世纪前半世纪;  3.分子生物学时期,20世纪50-60年代至今。  二、细胞生物学发展简史  1. 细胞的发现  2. 细胞学说的建立其意义  细胞学说内容:1) 认为细胞是有机体,一切动植物都是由细胞发育而来,并由细胞和细胞产物所构成;  2) 每个细胞作为一个相对独立的单位,既有它“自己的”生命,又对与其它细胞共同组成的整体的生命有所助益;3) 新的细胞可以通过老的细胞繁殖产生。  3. 细胞学的经典时期  1)原生质理论的提出2)细胞分裂的研究3)重要细胞器的发现  4. 实验细胞学与细胞学的分支及其发展  1)细胞遗传学的发展  2)细胞生理学的研究  3)细胞化学  5. 细胞生物学学科的形成与发展  三、细胞学说  Jean-Baptiste de Lamark (1744~1829),获得性遗传理论的创始人,法国退伍陆军中尉,50岁成为巴黎动物学教授,1809年他认为只有具有细胞的机体,才有生命。Charles Brisseau Milbel(1776~1854),法国植物学家,1802年认为植物的每一部分都有细胞存在, Henri Dutrochet (1776~1847),法国生理学家,1824年进一步描述了细胞的原理,  Matthias Jacob Schleiden(1804~1881),德国植物学教授,1838年发表“植物发生论”(Beitr?ge zur Phytogenesis),认为无论怎样复杂的植物都有形形色色的细胞构成。  Theodor Schwann(1810~1882),德国解剖学教授,一开始就研究Schleiden的细胞形成学说,并于1838年提出了“细胞学说”(Cell Theory)这个术语;1939年发表了“关于动植物结构和生长一致性的显微研究”  Schwann提出:有机体是由细胞构成的;细胞是构成有机体的基本单位。  1855 德国人R. Virchow 提出“一切细胞来源于细胞”(omnis cellula e cellula)的著名论断;进一步完善了细胞学说。  把细胞作为生命的一般单位,以及作为动植物界生命现象的共同基础的这种概念立即受到了普遍的接受。  恩格斯将细胞学说誉为19世纪的三大发现之一  第二章 细胞基本知识概要  本章内容提要:  第一节 细胞的基本概念  第二节 非细胞形态的生命体-------病毒及其与细胞的关系  第三节 原核细胞与古核细胞  第四节 真核细胞基本知识概要  第一节 细胞的基本概念  一、细胞是生命活动的基本单位  1、一切有机体都由细胞构成,细胞是构成有机体的基本单位;  2、细胞具有独立的、有序的自控代谢体系,细胞是代谢与功能的基本单位  3、细胞是有机体生长与发育的基础  4、细胞是遗传的基本单位,细胞具有遗传的全能性  5、没有细胞就没有完整的生命  二、细胞的基本共性  1.所有的细胞表面均有由磷脂双分子层与镶嵌蛋白质构成的生物膜,即细胞膜。  2.所有的细胞都含有两种核酸:即DNA与RNA作为遗传信息复制与转录的载体。  3.作为蛋白质合成的机器—核糖体,毫无例外地存在于一切细胞内。  4.所有细胞的增殖都以一分为二的方式进行分裂。  第二节 非细胞形态的生命体 —病毒及其与细胞的关系  一、病毒与细胞在起源与进化中的关系  病毒是非细胞形态的生命体,它的主要生命活动必须要在细胞内实现。病毒与细胞在起源上的关系,目前存在3种主要观点:  1.生物大分子→病毒→细胞 病毒  2.生物大分子 细胞  3.生物大分子→细胞→病毒  现在来说,第二种观点和第三种观点比较容易接受,而且第三种观点越来越有说服力。  认为病毒是细胞演化的产物的观点主要依据如下:  彻底的寄生性;  病毒核酸与哺乳动物细胞DNA某些片断的相似性;  病毒可以看成是核酸与蛋白质形成的复合大分子。  第三节 原核细胞与古核细胞  一、Basic characteristics of Prokaryotic cell  1. 遗传的信息量小,遗传信息载体仅由一个环状DNA或RNA构成;  2. 细胞内没有分化为以膜为基础的具有专门结构与功能的细胞器和细胞核膜。  二、原核细胞的主要代表  1、支原体  为什么说支原体是一个细胞  (1)能在培养基上生长,具有典型的细胞膜;  (2)具有环状的双螺旋DNA作为遗传信息量的载体;  (3)mRNA与核糖体结合形成多聚核糖体,指导蛋白质的合成;  (4)以一分为二的方式分裂繁殖。  支原体是最小、最简单的细胞。  2、细菌  1)、细菌的三种形态:球状、杆状和螺旋状  2)、细菌细胞的核区与基因组:细菌的核区实际主要由一个环状的DNA分子组成;现在也可以把细菌的环状DNA理解为细菌基因组。  3)、细菌细胞的表面结构:  A. 细胞膜:主要功能是选择性的交换物质----吸收营养物质,排出代谢废物,并且有分泌与运输蛋白的作用。  B. 细胞壁: 所有细菌的细胞壁的共同成分是肽聚糖,由乙酰氨基葡萄糖、乙酰胞壁酸与四五个氨基酸短肽聚合而成的多层网状大分子结构。  C. 细胞壁特化结构:a. 中膜体-----细胞膜内陷而形成的;b. 荚膜-----是一层松散的粘液物质,有一定程度的保护作用;c. 鞭毛-----细菌的运动器官,与真核生物的鞭毛不同,它是由一种称为鞭毛蛋白的弹性蛋白所构成。  4)、细菌细胞的核糖体——部分附着在细胞膜内侧,大部分游离于细胞质中,与蛋白质的合成密切相关。  5)、细菌细胞核外DNA------质粒,是裸露环状DNA,在遗传工程研究中很重要。  6)、细菌细胞的内生孢子,即芽孢,是细菌对不良环境或营养耗尽时的反应。  3. 蓝藻细胞:是最简单的自养植物类型之一。  基本特征:1)中心质------相当于细菌的核区,是遗传物质DNA所在部位。  2)光合片层-----位于细胞质部分,是同心环状的膜片层结构,上边附着有藻胆蛋白体(包括藻蓝蛋白,一藻蓝蛋白和藻红蛋白),能够把光能传递给叶绿素a,进行原始光和作用。  3)细胞质内含物  4)细胞表面结构  5)细胞分裂  四、原核细胞与真核细胞的比较  1、原核细胞与真核细胞最根本的区别 :  (1)、细胞膜系统的分化和演变。 细胞内部结构和职能的分工是真核细胞区别于原核细胞的重要标志。  (2)、遗传信息量与遗传装置的扩增与复杂化。 遗传信息重复序列与染色体多倍性的出现是真核细胞区别于原核细胞的另一重要标志。  (3)、真核细胞内,遗传信息的转录与翻译有严格的阶段性和区域性,而在原核细胞内则是转录与翻译可以同时发生  五、原核细胞与真核细胞基本特征的比较(p36)  六、原核细胞与真核细胞的遗传结构装置和基因表达的比较(p37)  七、古细菌  古细菌(archaebacteria)与真核细胞曾在进化上有过共同历程  主要证据  (1)细胞壁的成分与真核细胞一样,而非由含壁酸的肽聚糖构成,因此抑制壁酸合成的链霉素, 抑制肽聚糖前体合成的环丝氨酸,抑制肽聚糖合成的青霉素与万古霉素等对真细菌苹果签名系统类有强的抑制生长作用,而对古细菌与真核细胞却无作用。  (2)DNA与基因结构:古细菌DNA中有重复序列的存在。此外,多数古核细胞的基因组中存在内含子。  (3)有类核小体结构:古细菌具有组蛋白,而且能与DNA构建成类似核小体结构。  (4)有类似真核细胞的核糖体:多数古细菌类的核糖体较真细菌有增大趋势,含有60种以上蛋白,介于真核细胞(70~84)与真细菌(55)之间。抗生素同样不能抑制古核细胞类的核糖体的蛋白质合成。  (5)5S rRNA:根据对5S rRNA的分子进化分析,认为古细菌与真核生物同属一类,而真细菌却与之差距甚远。5S rRNA二级结构的研究也说明很多古细菌与真核生物相似。  第四节 真核细胞基本知识概要  一、真核细胞的基本结构体系  1.生物膜系统:以脂质及蛋白质成分为基础的生物膜结构系统;  2.遗传信息表达结构系统:以核酸(DNA或RNA)与蛋白质为主要成分的遗传信息表达系统  3.细胞骨架系统:由特异蛋白分子装配构成的细胞骨架系统。  二、细胞的大小及其分析  各类细胞直径的比较  三、植物细胞与动物细胞的比较  植物细胞特有的结构: 1. 细胞壁 2. 液泡 3. 叶绿体  第三章 细胞生物学研究方法  本章内容提要:  第一节 细胞形态结构的观察方法  第二节 细胞组分的分析方法  第三节 细胞培养、细胞工程与显微操作技术  第一节 细胞形态结构的观察方法  一、光学显微镜技术  (一)普通光学显微镜  ? 1. 构成:  ? ①照明系统  ? ②光学放大系统  ? ③机械装置  ? 2. 原理:经物镜形成倒立实像,经目镜进一步放大成像。  ? 3. 分辨率:指分辨物体最小间隔的能力。  (二)荧光显微镜 Fluorescence microscope  特点:光源为紫外线,波长较短,分辨力高于普通显微镜;  有两个特殊的滤光片;  照明方式通常为落射式。  用于观察能激发出荧光的结构。用途:免疫荧光观察、基因定位、疾病诊断。  (三)激光共聚焦扫描显微境  Laser confocal scanning microscope, LCSM  用激光作光源,逐点、逐行、逐面快速扫描。  能显示细胞样品的立体结构。  分辨力是普通光学显微镜的3倍。  用途类似荧光显微镜,但能扫描不同层次,形成立体图像。  (四)相差显微镜  ? 把透过标本的可见光的光程差变成振幅差,从而提高了各种结构间的对比度,使各种结构变得清晰可见。在构造上,相差显微镜有不同于普通光学显微镜两个特殊之处。  ? 环形光阑(annular diaphragm):位于光源与聚光器之间。  ? 相位板(annular phaseplate):物镜中加了涂有氟化镁的相位板,可将直射光或衍射光的相位推迟1/4λ。  原理  用途:观察未经染色的玻片标本  (五)微分干涉差显微镜 Differential interference contrast microscope (DIC)  ? 1952年,Nomarski发明,利用两组平面偏振光的干涉,加强影像的明暗效果,能显示结构的三维立体投影。标本可略厚一点,折射率差别更大,故影像的立体感更强。  二、电子显微镜  1、电子显微镜的基本知识  电镜与光镜的比较  显微镜 分辨本领 光源 透镜 真空 成像原理  LM 200nm 可见光(400-700) 玻璃透镜 不要求真空 利用样品对光的吸收形成明暗反差和颜色变化  100nm 紫外光(约200nm) 玻璃透镜 不要求真空  TEM 0.1nm 电子束(0.01-0.9) 电磁透镜 要求真空 利用样品对电子的散射和透射形成明暗反差  2、 原理  ? 以电子束作光源,电磁场作透镜。电子束的波长短,并且波长与加速电压(通常50~120KV)的平方根成反比。  ? 由电子照明系统、电磁透镜成像系统、真空系统、记录系统、电源系统等5部分构成。  ? 分辨力0.2nm,放大倍数可达百万倍。  ? 用于观察超微结构(ultrastructure),即小于0.2μm、光学显微镜下无法看清的结构,又称亚显微结构(submicroscopic structures)。  3、主要电镜制样技术  ? 1)超薄切片  ? 电子束穿透力很弱,用于电镜观察的标本须制成厚度仅50nm的超薄切片,用超薄切片机(ultramicrotome)制作。  ? 通常以锇酸和戊二醛固定样品,丙酮逐级脱水,环氧树脂包埋,以热膨胀或螺旋推进的方式切片,重金属(铀、铅)盐染色。  ? 2)负染技术  用重金属盐(如磷钨酸)对铺展在载网上的样品染色;吸去染料,干燥后,样品凹陷处铺了一层重金属盐,而凸的出地方没有染料沉积,从而出现负染效果,分辨力可达1.5nm左右。  3)冰冻蚀刻 freeze-etching  ? 亦称冰冻断裂。标本置于干冰或液氮中冰冻。然后断开,升温后,冰升华,暴露出了断面结构。向断裂面上喷涂一层蒸汽碳和铂。然后将组织溶掉,把碳和铂的膜剥下来,此膜即为复膜(replica)。  三、扫描隧道显微镜  scanning tunneling microscope,STM  ? 原理:根据隧道效应而设计,当原子尺度的针尖在不到一个纳米的高度上扫描样品时,此处电子云重叠,外加一电压(2mV~2V),针尖与样品之间形成隧道电流。电流强度与针尖和样品间的距离有函数关系,将扫描过程中电流的变化转换为图像,即可显示出原子水平的凹凸形态。  ? 分辨率:横向为0.1~0.2nm,纵向可达0.001nm。  ? 用途:三态(固态、液态和气态)物质均可进行观察。  第二节 细胞组分的分析方法  一、离心分离技术  用途:于分离细胞器与生物大分子及其复合物  转速为10~25kr/min的离心机称为高速离心机。  转速>25kr/min,离心力>89Kg者称为超速离心机。  目前超速离心机的最高转速可达100000r/min,离心力超过500Kg。  (一)差速离心 Differential centrifugation  ? 特点:  – 介质密度均一;  – 速度由低向高,逐级离心。  ? 用途:分离大小相差悬殊的细胞和细胞器。  ? 沉降顺序:核——线粒体——溶酶体与过氧化物酶体——内质网与高基体——核蛋白体。  ? 可将细胞器初步分离,常需进一步通过密度梯离心再行分离纯化。  (二)密度梯度离心  ? 用介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度,将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部,通过离心力场的作用使细胞分层、分离。  ? 类型:速度沉降(velocity sedimentation)、等密度沉降(isopycnic sedimentation)。  ? 常用介质:氯化铯、蔗糖、多聚蔗糖。  ? 分离活细胞的介质要求:  – 1)能产生密度梯度,且密度高时,粘度不高;  – 2)PH中性或易调为中性;  – 3)浓度大时渗透压不大;  – 4)对细胞无毒。  二、 细胞内核酸、蛋白质、酶、糖与脂类等的显示方法  ?原理:利用一些显色剂与所检测物质中一些 特殊基团特异性结合的特征,通过显 色剂在细胞中的定位及颜色的深浅来判断某种物质在细胞中的分布和含量。  Feulgen Staining  三、特异蛋白抗原的定位与定性  1、免疫荧光技术: 快速、灵敏、有特异性,但其分辨率有限  2、蛋白电泳(SDS-PAGE)与免疫印迹反应(Western-Blot)  3、免疫电镜技术:  ?免疫铁蛋白技术  ?免疫酶标技术  应用:通过对分泌蛋白的定位,可以确定某种蛋白的分泌动态;胞内酶的研究;膜蛋白的定位与骨架蛋白的定位等  四、细胞内特异核酸的定位与定性  ?光镜水平的原位杂交技术(同位素标记或荧光素标记的探针)  ?电镜水平的原位杂交技术(生物素标记的探针与抗生物素抗体相连的胶体金标记结合)  ?PCR技术  五、放射自显影技术  1、原理及应用:  ?利用同位素的放射自显影,对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量研究;  ?实现对细胞内生物大分子进行动态和追踪研究。  2、步骤:  ?前体物掺入细胞(标记:持续标记和脉冲标记)  ———放射自显影  六、定量细胞化学分析技术  1、显微分光光度术(Microspectrophotometry)  ?利用细胞内某些物质对特异光谱的吸收,测定这些物质(如核酸与蛋白质等)在细胞内的含量。  包括: 紫外光显微分光光度测定法  可见光显微分光光度测定法  ? 流式细胞仪(Flow Cytometry)  ?主要应用:  用于定量测定细胞中的DNA、RNA或某一特异蛋白的含量;  测定细胞群体中不同时相细胞的数量;  从细胞群体中分离某些特异染色的细胞;  分离DNA含量不同的中期染色体。  第三节 细胞培养、细胞工程与显微操作技术  一、细胞的培养  1、动物细胞培养  (1) 类型:A 原代培养细胞(primary culture cell)---从机体取出后立即 培养的细胞。1-10代以内的细胞培养称为原代培养细胞。  B 继代培养细胞(sub-culture cell)---适宜在体外培养条件下持续传代培养的细胞称为传代培养细胞  (2) 细胞株(cell strain) 正常二倍体,接触抑制.10~50代  (3) 细胞系(cell line) 亚二倍体或非整倍体,接触抑制丧失,容易传代培养。50代以后。  2、植物细胞  (1)、 原生质体培养 (体细胞培养)  (2)、单倍体细胞培养(花药培养)  3、非细胞体系(cell-free system):  只来源于细胞,而不具有完整的细胞结构,但包含了进行正常生物学反应所需的物质组成体系。  二、细胞工程  1、细胞工程:  在细胞水平上有计划的保存、改变和创造细胞遗传物质,以产生新的物种和品系,或大规模培养组织细胞以获得生物产品。  其所使用的技术主要是:细胞培养、细胞分化的定向诱导、细胞融合与显微注射。  2、细胞融合(cell fusion)与细胞杂交(cell hybridization)技术  ? 用人工方法把同种或不同种的两个或两个以上的细胞,通过介导物作用,融合成一个细胞的技术。亦称细胞杂交(cell hybridization)  ? 同核融合细胞  ? 异核融合细胞  3、单克隆抗体(monoclone antibody)技术  单克隆抗体技术  ? 正常淋巴细胞(如小鼠脾细胞)具有分泌抗体的能力,但不能长期培养,瘤细胞(如骨髓瘤)可以在体外长期培养,但不分泌抗体。于是英国人Kohler和Milstein 1975将两种细胞杂交而创立了单克隆抗体技术,获1984年诺贝尔奖。  第四章 细胞质膜与细胞表面  第一节 细胞质膜与细胞表面特化结构  第二节 细胞连接  第三节 细胞外被与细胞外基质  第一节 细胞质膜与细胞表面特化结构  ? 细胞膜(cell membrane)又称质膜(plasma membrane),是指围绕在细胞最外层,由脂质和蛋白质组成的生物膜。细胞膜只是真核细胞生物膜的一部分,真核细胞的生物膜(biomembrane)包括细胞的内膜系统(细胞器膜和核膜)和细胞膜(cell membrane)。  一、细胞膜的结构模型  1、结构模型  1) 三明治质膜结构模型: E.Gorter和F.Grendel(1925), 提出 “protein-lipid-protein”三夹板或三明治质膜结构模型,这一模型影响20年之久。  2) 单位膜模型(unit membrane model):J.D.Robertson(1959年),提出单位膜模型,大胆的推断所有的生物膜都是由蛋白质-脂类-蛋白质单位膜构成,在电镜下观察,细胞膜显示出 暗---亮----暗三条带,两侧的暗带的厚度约2nm, 推测是蛋白质,中间的亮带厚度约3.5nm,推测是脂双层分子。整个膜的厚度约是7.5nm。  3) 流动镶嵌模型(fluid mosaic model): S.J.Singer和G.Nicolson(1972),提出生物膜的流动镶嵌模型(fluid mosaic model),这种模型认为细胞膜是由脂质双分子层组成,蛋白质以不同的方式,镶嵌,覆盖或横跨双分子层。流动镶嵌模型强调了,a 膜的流动性,b 膜蛋白分布的不对称性。  4) 脂筏模型(lipid rafts model): K.Simons et al(1997),提出了脂筏模型(lipid rafts model)Functional rafts in Cell membranes. Nature 387:569-572。  2、生物膜结构  目前对生物膜结构的认识可以归纳如下:  1)磷脂双分子层是组成生物膜的基本结构成分,尚未发现膜结构中起组织作用的蛋白;  2)蛋白分子以不同方式镶嵌在脂双层分子中或结合在其表面, 膜蛋白是赋予生物膜功能的主要决定者;  3)生物膜可以看成是蛋白质在双层脂分子的二维溶液。  二、生物膜的组成成分  (一)、膜脂成分:膜脂主要包括磷脂、糖脂和胆固醇三种类型。  ? 1、磷脂:1)膜脂的基本成分(50%以上)  ? 2)分为二类: a 甘油磷脂(磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰肌醇)  ? b 鞘磷脂  ? 3) 主要特征:①具有一个极性头和两个非极性的尾(脂肪酸链) (心磷脂除外);  ? ②脂肪酸碳链为偶数,多数碳链由16,18或20个组成;  ? ③既具有饱和脂肪酸(如软脂酸)又有不饱和脂肪酸(如油酸);  ? 2、糖脂:糖脂普遍存在于原核和真核细胞的质膜上(5%以下),神经细胞糖脂含量较高;  ? 3、胆固醇: 1)胆固醇存在于真核细胞膜上(30%以下),细菌质膜不含有胆固醇,但某些细菌的膜脂中含有甘油脂等中性脂类。  ? 2)胆固醇的作用:  ? ① 调节膜的流动性;  ? ② 增加膜的稳定性;  ? ③ 降低水溶性物质的通透性。  (二)、膜脂的运动方式  ? 1、侧向运动: 沿膜平面的侧向运动(基本运动方式)  ? 2、自旋运动: 脂分子围绕轴心的自旋运动;  ? 3、 摆 动: 脂分子尾部的摆动;  ? 4、 翻转运动:双层脂分子之间的翻转运动,发生频率还不到脂分子侧向交换频率的  ? 10-10。但在内质网膜上,新合成的磷脂分子翻转运动发生频率很高。
  • 2021-12-22 00:41:33
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