biolog微生物鉴定系统,Biolog微生物识别步骤一种检测原理Biolog微生物识别系统测试微生物利用或氧化的能力和识别板中的物体。测试产生特征紫色孔模式,构成代谢指纹。预先预添加所需的营养物和生化试剂,Tetrazoli是一种氧化染料,表明碳源的使用。识别步骤非常简单,并且纯化的菌株膨胀,然后将接种液体加入识别板上。在培养期间,可以氧化一些孔中的化学物质,并且显影材料是紫色的,并且控制孔(A-1)和负孔仍然无色。在相应的培养条件下培养识别板或形成代谢模式。系统软件自动和数据库比较,如果您找到合适的匹配,可以获得身份验证结果T。设备和耗材:Ⅳ型,接种,巯基硫酸钠,长棉拭子,接种物,储层,八个移液管,移液管,浊度,浊度标准,温度控制培养箱和相应识别板。其中,配制,接种的接种液体,储存器可用于取代国内品牌。三个识别步骤:Biolog微生物鉴定样品处理步骤分离纯化培养基虫+ B通用培养基加羊血Bua + B厌氧培养基加羊血液购买酵母培养基2%Me2%麦芽提取物提取物染料染色菌株的形态革兰染料的形式革兰阴克阳性Anaracothenevaraceininica-Formal真菌证实了实验氧化酶反应阳性氧化酶反应阴性,三升铁实验A / A或K / A巧克力培养基或6.5%CO 2培养确认实验氧化酶反应阴性,三苯甲酸铁实验k /K或K / AW微生物型GN-NN-FAS GN-ENT肠道细菌GN-FAS苛性菌GP -coccus-Roc菌,GP-Coccus,GP-COD芽孢杆菌GP-棒(Bacillus)厌氧,YT酵母FF丝状真菌扩大介质+ BBUG + B巧克力介质BUG + BBUG + M + TBUA + BBUY2%ME ME培养温度30°C 35-37°C 35-37°C 35-37°C 30°C 35-37°C 26°C 26°C培养气空气空气空气6.5%CO 2空气或6.5%CO 2无无无厌氧厌氧环境空气疫苗接种液体型GN / GP-IFGN / GP-IF + TGN / GP-IF + TGN / GP-IF +TGN / GP-IFAN-如果水FF - 如果接种疫苗接种浊度/浊度标准管52%TGN -NENT61%TGN-ENT20%TGP-COC&GP-ROD&GN-FAS20%TGP-COC&GP-ROD&GN-FAS28%TGP-ROD SB65%TAN47%TYT75%TFF认证板型/每颗孔量悬浮液GN2150μLGN2150μLGN2150μLGP2150μLGP2150μL100μLGP2150μL100μL100μLFF100μL培养时间(小时)4-6,16-244-6,16-2444-6,16-2420-2424,48,7224,48 72,96 stEP 1:纯化在我们自己的培养基上的菌株,如果菌株是冻干或冷冻样品,则必须通过2-3代,让菌株恢复。为了使纯化菌株染色,确定菌株是革兰氏阴性的或阳性。用显微镜观察外部形态或观察菌株的形式,确定酵母仍然是丝状真菌,它是细菌或杆菌。如果是革兰阴性细菌,还有必要最终确定肠道细菌,非肠道或地壳。该方法是氧化酶阳性或氧化酶阴性但三核基毒素是K / K或K / Aw,并且菌株是结直肠细菌(GN型),氧化酶阴性和三糖铁实验是A / A.或K / A,应变是GN-ENT。如果需要在巧克力培养基或6.5%CO 2上培养菌株1,在虫+ B培养中非常差,则在针尖尺寸中形成菌落,然后这些细菌可以被认为是烧焦(GN-FAS)。最益生菌苛刻的症状肠道肠道出来,如actinobacillus,alysiella,brucella,capnocytophaga,cdc组df-3,cdc组,eikenella,hemophilus,Kingella,moraxella,neisseria,simonsiella,suttonella和taylesiella。如果它是革兰氏阳性细菌,它可以容易地与革兰氏染色的区别,并且建议是过氧化氢酶的实验,并且最终确定苏格兰也是枯草芽孢杆菌。杆菌可以通过革兰兹或观察到的菌落来区分。微生物的扩张应该使用Biolog推荐的中和培养条件来使微生物能够实现最佳的代谢活动,并准确地匹配数据库中的代谢模式。微生物应该是新鲜的,以确保它处于指数增长期,因为在达到稳定的时期时,某些菌株会失去存活能力或代谢活动,并且推荐的培养循环为4-24小时。如果文化量为exaDED不足以配制相应的浊度,可以培养多个板,培养时间可以延长至48小时。第2步:首先,确定摩托计没有打开电源,指针应参考0%,如果没有,请用螺丝刀调整它。采取电源,用接种液体取出试管,擦拭管壁,将其放入浊度仪中,指针应参考100%,如果没有,旋转ricequare旋钮。然后使用浊度标准管测试,读数为±2%是正常的。在接种待使用的液体的情况下,用相应的试管进行100%校正,并且不会在浊度的光路中旋转试管。当鉴定革兰氏阴性肠道细菌和穗状体细胞时,应加入液体钠钠钠钠。巯基钠的作用是抑制孢子,可以部分或完全抑制紫色由于使用本身使用本身,因此由于微生物而发生。需要将一些直肠细菌添加到硫醇钠中。根据以下步骤制备均匀的细菌悬浮液:棉签用疫苗接种溶液略微润湿,并用棉花棉签轻轻卷绕到接种液体中,使培养基或其他营养物疫苗接种。液体。首先服用单一的殖民地,不足以占据紧密殖民地。旋转挤出棉签可以分散在试管的内壁中的液体表面的接种中。然后,然后移动棉拭子,并将分散的菌落和接种的流体彻底混合以形成均匀的无菌基团悬浮液。如果细菌悬浮液有细菌,则可以将细菌制成管道的底部。 达到浊度直到达到允许的范围,增加接种解决方案或向Redu添加殖民地Ce或升高了声悬浮液的密度。 将细菌悬浮悬浮液转向识别板,不超过20分钟。如果长时间部分接种到认证板中,一些真菌将失去代谢活动。第3步:板板。将细菌悬浮液倒入储罐中,不要倒在一起,因为试管的底部可具有未取代的细胞。进行根据不同评估板的移液器的过程选择,将移液管头放置在移液管上。如有必要,可以用手加强,以避免上部漏气。细菌悬浮液的分离,观察每个移液管头中的液体是否一致,如果不一致,则释放细菌悬浮液,并加强移液管头。添加细菌悬浮液后,盖上盖子。步骤4:培养环境根据指定的菌株确定。准备塑料容器,湿润纸巾在底部,将识别牌放在纸巾上,防止纸张外部断裂孔的蒸发。对于革兰氏阴性阳性细菌,培养识别板4-6小时,可以进行读数过夜(16-24小时)。厌氧细菌可以在20-24小时后进行研究。酵母和丝状真菌所需的培养时间略长,并且数量在24小时内每一次读一次。步骤5:打开读卡器和计算机,打开Biolog软件,并初始化读取仪器,设置参数(培养时间,应变名称,应变号,应变类型),用纸巾擦拭纸巾的底部放置,A-1孔位于左侧。您可以单击“阅读此”以进行读取。识别结果自动显示在屏幕下,可以保存生成的数据。
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什么是微生物鉴定,自动微生物识别系统是传统的微生物鉴定。“Bergie细菌识别手册”和“真菌识别手册”,识别过程繁琐,时间长,易于错误,经验非常高。商业自动微生物系统有效解决了这个问题,目前的自动微生物识别系统目前原则上包括:1)基于图像的识别方法:如Microdation和Omnilog自动微生物学识别系统的Biolog,USA,基于95可以通过2,650个细菌,酵母和霉菌鉴定碳或化学敏感物质的利用;还存在一种基于脂肪酸鉴定的方法,通过气相色谱分析微生物细胞壁的脂肪酸组成;在临床领域,不复存器,BD,热电和西门子具有相应的自动微生物学I牙本质系统,及其数据库主要通过致病细菌鉴定,通常是200-600个数据库,可用于测试;2)基于基因型鉴定方法:测序法和遗传带图法,生活中的典型代表和杜邦。3)基于蛋白质识别:基于Brooke和Merrier,基于蛋白质飞行质谱平台,分析了不同高度保守的微生物核糖体蛋白电解质后的电子飞行时间。三种类型的方法具有优缺点,理论上无法冲突,应该是互补的,应根据需要选择。
责任编辑(
胡天泉)
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