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- 电泳技术，是指在电场作用下，带电颗粒在由于所带的电荷不同以及分子大小差异而有不同的迁移行为从而彼此分离开来的一种实验技术。 许多生物分子都带有电荷，其电荷的多少取决于分子结构及所在介质的pH值和组成。由于混合物中各种组分所带电荷性质、电荷数量以及相对分子质量的不同，在同一电场的作用下，各组分泳动的方向和速率也各异。因此，在一定时间内各组分移动的距离也不同，从而达到分离鉴定各组分的目的。 电泳技术主要用于分离各种有机物（如氨基酸、多肽、蛋白质、脂类、核苷酸、核酸等）和无机盐；也可用于分析某种物质纯度，还可用于分1981子量的测定。电泳技术与其他分离技术（如层析法）结合，可用于蛋白质结构的分析，“指纹法”就是电泳法与层析法的结合产物。用免疫原理测试电泳结果，提高了对蛋白质的鉴别能力。电泳与酶学技术结合发现了同工酶，对于酶的催化和调节功能有了深入的了解。所以电泳技术是医学科学中的重要研究技术。 纸电泳和醋酸纤维薄膜电泳 纸电泳用于血清蛋白质分离已有相当长的历史，在实验室和临床检验中都曾经广泛应用。自从1957年Kohn首先将醋酸纤维薄膜用作电泳支持物以来，纸电泳已被醋酸纤维薄膜电泳所取代。因为后者具有比纸电泳电渗小、分离速率快、分离清晰、血清用量少以及操作简单等优点。 琼脂糖凝胶电泳 琼脂经处理去除其中的果胶成分即为琼脂糖。由于琼脂糖中硫酸根含量较琼脂为少，电渗影响减弱，因而使分离效果显著提高。例如血清脂蛋白用琼脂凝胶电泳只能分出两条区带（α-脂蛋白、β-脂蛋白），而琼脂糖凝胶电泳可将血清脂蛋白分出三条区带（α-脂蛋白、前β-脂蛋白和β-脂蛋白）。所以琼脂糖为较理想的凝胶电泳的一种材料。 血清中的脂类物质与载脂蛋白结合成水溶性的脂蛋白形式存在，各种脂蛋白中所含的载脂蛋白种类和数量不同、脂蛋白颗粒大小不同等因素，使它们在电场中的移动速率各异，因而可以通过电泳达到分离。 聚丙烯酰胺凝胶电泳 聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的凝胶，具有机械强度好、弹性大、透明、化学稳定性高、无电渗作用、设备简单、样品量小（1~100ug）、分辨率高等优点，并可通过控制单体浓度或单体与交联剂的比例，聚合成不同孔径大小的凝胶，可用于蛋白质、核酸等分子大小不同的物质的分离、定性和定量分析。还可结合解离剂十二烷基硫酸钠（SDS），以测定蛋白质亚基的相对分子质量 电泳原理： 电泳是电泳涂料在阴阳两极，施加于电压作用下，带电荷之涂料离子移动到阴极， 并与阴极表面所产生之碱性作用形成不溶解物，沉积于工件表面。 它包括四个过程： 1 ）电解（分解） 在阴极反应最初为电解反应，生成氢气及氢氧根离子 OH ，此反应造成阴极面形成 一高碱性边界层，当阳离子与氢氧根作用成为不溶于水的物质，涂膜沉积，方程式 为： H2O→OH+H 2 ）电泳动（泳动、迁移） 阳离子树脂及 H+ 在电场作用下，向阴极移动，而阴离子向阳极移动过程。 3 ）电沉积（析出） 在被涂工件表面，阳离子树脂与阴极表面碱性作用，中和而析出不沉积物，沉 积于被涂工件上。 4 ）电渗（脱水） 涂料固体与工件表面上的涂膜为半透明性的，具有多数毛细孔，水被从阴极涂 膜中排渗出来，在电场作用下，引起涂膜脱水，而涂膜则吸附于工件表面，而 完成整个电泳过程。
- 2021-12-15 14:37:39
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- 聚丙烯酰胺凝胶电泳原理原理是一种网状结构，其具有分子筛效应。它有两种形式。一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶，并且蛋白质在电泳中保持完整。蛋白质根据三个因素分离。：蛋白质尺寸，形状和电荷。SDS-PAGE仅根据蛋白质分子量亚基分离蛋白质。该技术是1967年Shapiro建立的。他们发现在添加电离洗涤剂和在样品介质和丙烯酰胺凝胶中的强还原剂后，蛋白质亚基的电泳主要取决于亚基分子量和电荷因子的尺寸。它可以被忽略。SDS是一种阴离子洗涤剂，作为变性剂和共试剂，可以在分子和分子之间破坏氢键以折叠分子，破坏蛋白质分子的第二个。三阶段结构。和强大的还原剂如MERCAptohanol，二硫代醇可以使塞子中的插头之间的Diway绑定。在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后，将分子脱溶于多肽链中，氨基酸侧链和SDS结合到蛋白质-SDS胶束中，该带的负电荷大大超过原始蛋白质蛋白质的量。这消除了不同分子之间的电荷差异和结构差之间的差异。SDS-PAGE通常使用具有比连续缓冲系统更高分辨率的不连续缓冲系统。浓缩胶的效果是散装效应，小凝胶浓度，大孔径和较薄的样品加入到浓缩物中，并且将大孔径凝胶的迁移浓缩到窄区域。选择Tris / HCl缓冲液用于Tris / HCl缓冲液，选择Tris /甘氨酸。电泳开始后，HCl离解成氯离子，甘氨酸与a离脱少量的糖型离子。蛋白质带负电，因此将氯离子离子一起移动，氯化物离子是最快的，糖凝块离子较慢，并且蛋白质是以中心的。电泳期间氯化物游泳速率最高，超过蛋白质，因此形成低导电区，电场强度与低电导区成反比，因此产生更高的电场强度，使蛋白质产生更高的电场强度，使蛋白质产生更高的电场强度糖酸盐离子迅速移动，形成稳定的界面允许蛋白质在移动界面附近积聚并浓缩成中间层。
- 2021-12-15 14:36:13
- dfgj
- 电泳原理,核酸带负电，在有电流存在的情况下会向正极移动，琼脂糖凝胶具有分子筛作用，在电泳缓冲液中分子量大的移动慢，分子量小的移动快
- 2021-12-15 14:36:13
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